薄層色譜儀自身的優(yōu)勢(shì),其特點(diǎn):儀器簡(jiǎn)單、操作方便、快速、幾至幾十分鐘完成、靈敏度高、試樣處理簡(jiǎn)單、可以給出感性直觀結(jié)果(彩色譜圖)、經(jīng)濟(jì)等。
薄層色譜儀薄層的制備:玻璃板規(guī)格,平整光滑;固定相加粘合劑研磨混勻;鋪板:均勻、105活化備用;另外介紹商用薄層板的分類;動(dòng)畫演示制板過(guò)程。點(diǎn)樣:試樣配置1-2%,用揮發(fā)性溶劑;位置:在薄層板底端1.5cm畫一條基線,標(biāo)出點(diǎn)樣位置間隔1.5cm,據(jù)邊緣2cm,并解釋劃線標(biāo)點(diǎn)的意義;量:少點(diǎn)樣,輕觸,斑點(diǎn)要小一般小于3mm,少量多次揮干后再點(diǎn);揮干后再展開動(dòng)畫演示點(diǎn)樣過(guò)程。展開:根據(jù)相似相容原則選展開劑,比例準(zhǔn)確量取,混勻后飽和20min左右,展開距離即溶劑前沿距基線的距離控制適當(dāng),動(dòng)畫演示展開過(guò)程。
如果沒有飽和可能會(huì)出現(xiàn)邊緣效應(yīng),解釋邊緣效應(yīng)的原因:由于展開劑有不同溶劑組成,揮發(fā)性不同,在溶劑上行過(guò)程中極性小的溶劑邊緣處易揮發(fā),造成邊緣的極性比中心大,溶劑沿邊緣移動(dòng)快,造成邊緣效應(yīng)。解決方法:飽和,展開槽內(nèi)壁貼濾紙,少點(diǎn)樣、靠中間點(diǎn)樣。檢出:達(dá)到一定的展距后,拿出薄層板,先在溶劑前沿畫一條線,記錄前沿距離;光學(xué)檢出:本身有顏色;紫外吸收;熒光板在紫外燈下定位斑點(diǎn);試劑檢出:噴霧、浸漬、蒸汽。定性:薄層色譜通常利用比移值Rf即原點(diǎn)到斑點(diǎn)中心距離比溶劑展開距離。定性鑒別,分別計(jì)算對(duì)照品的Rf與供試品的Rf值,若一致即為同一物質(zhì)。
薄層色譜儀是一種非常有用的跟蹤反應(yīng)的手段,還可以用于柱色譜分離中合適溶劑的選擇。薄層色譜常用的固定相有氧化鋁或硅膠。流動(dòng)相則是一種極性待選的溶劑。將溶液中的反應(yīng)混合物點(diǎn)在薄板上,然后利用毛細(xì)作用使溶劑(或混合溶劑)沿板向上移動(dòng)進(jìn)行展開。根據(jù)混合物中組分的極性,不同化合物將會(huì)在薄板上移動(dòng)不同的距離。極性強(qiáng)的化合物會(huì)“粘”在極性的硅膠上,在薄板上移動(dòng)的距離比較短。而非極性的物質(zhì)將會(huì)在流動(dòng)的溶劑相中保留較長(zhǎng)的時(shí)間從而在板上移動(dòng)較大的距離。